1991年，曾小敏考入广东粤剧学校。1994年，获广东省首届粤剧演艺大赛铜奖 。1995年，获中国中等专业艺术学校“梨园杯”一等奖第一名 。1996年，曾小敏参加全国戏校梨园杯大赛。1997年，曾小敏被分配到广东粤剧院工作 。
2003年，曾小敏参加中国戏曲演唱大赛。2004年1月1日，曾小敏表演昆曲改编曲目《寻梦》 。2005年，广东粤剧院成立青年团，曾小敏当选副团长。2006年，曾小敏主演粤剧新编剧目《大明悲歌》《越国孤雁》。
2009年，曾小敏当选广东粤剧院院长助理 。2011年11月，曾小敏主演现代粤剧剧目《青春作伴》 。2014年，曾小敏当选广东省政协第十一届委员、广东粤剧院副院长。同年，曾小敏表演粤剧剧目《白蛇传·情》 。
2015年2月10日，曾小敏举办“穿越时尚——曾小敏粤剧经典演唱会” 。8月6日，其主演的粤剧电影《传奇状元伦文叙》在广州公映 。
2017年5月22日，曾小敏获第28届中国戏剧梅花奖 。2018年1月，任第十三届全国人民代表大会代表 。1月16日，曾小敏领衔主演的神话粤剧电影《柳毅奇缘》首映 。10月1日，参加《2018国庆戏曲演唱会》，演唱粤曲《南国风采》 。
2019年2月4日，曾小敏参加《2019年中央广播电视总台春节联欢晚会》，参与戏曲《锦绣梨园》表演 。3月10日，参加央视戏曲节目《角儿来了》 。6月，获第十六届文华表演奖 。9月12日上午，被聘任为广东粤剧院院长 。10月2日，参加央视戏曲节目《一鸣惊人》，表演尾声《此生最爱是梨园》 。12月7日，参加中国青年电视公开课节目《开讲啦》，为观众带来她和粤剧之间的故事，以及她对于传统文化传承与创新的思考 。
2020年4月10日，曾小敏被确认为广东省第六批省级非物质文化遗产代表性项目（粤剧）代表性传承人 。9月27日，参加网易云音乐与新华社“声在中国”联合推出的非遗音乐纪录微综艺《不曾遗忘的符号》播出第三期《好耐冇见啦》，与Tizzy T谢锐韬创作并演绎了说唱版《帝女花》 。
2021年2月11日，曾小敏参加《2021年中央广播电视总台春节联欢晚会》，参与戏曲《盛世百花园》表演 。2月12日，参加《2021年中央广播电视总台春节戏曲晚会》，与汤非、张馨月、萧雅、王二妮、冯咏梅合作序曲《唱响新时代》 。2月16日，参加央视戏曲节目《一鸣惊人》，演唱粤语歌《揽水见月圆》 。2月26日，参加《2021元宵戏曲晚会》，与丁凡合作粤剧剧目《宝莲灯》 。3月，开启曾小敏粤剧艺术全国巡演，从大湾区出发 。5月20日，领衔主演的粤剧电影《白蛇传·情》上映，在剧中扮演白素贞 。12月6日，参加央视戏曲节目《一鸣惊人》，为观众开启一堂别开生面的“梨园公开课” 。12月31日，参加《2021最美的夜 bilibili晚会》，与梁汉文出演节目《白蛇传·情》主题秀 。
2022年1月1日，曾小敏参加《扬帆远航大湾区——2022新年音乐会》，与董宝石、崔子格表演开场曲《大湾区协奏曲》 。2022年2月1日，曾小敏参加广东卫视的《2022龙腾虎跃大湾区广东卫视春节晚会》，与张卫健等表演粤剧交响乐《侠骨柔情》 。2月，参加中国文学艺术界2022春节大联欢《百花迎春》晚会，表演广东粤剧《白蛇传·情》 。
